尊龙凯时推出的一款基于探针法荧光定量PCR原理研发的检测试剂盒，结合了多项显著特点，旨在为生物医疗领域提供高效、可靠的解决方案。

产品特点

1. 即开即用：用户仅需提供样品DNA模板。
2. 高灵敏度：优化的引物等组分，确保精准检测。
3. 阳性对照提供：便于区分假阴性样本。
4. 高特异性：引物以中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区为设计依据，可避免与其他生物样本的DNA发生交叉反应。
5. 双重检测：适用于定性与定量检测，其中定量检测的线性范围至少达到5个数量级。
6. 反应能力强：产品可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 科研专用：仅限于科研用途。

使用方法

一、DNA提取

使用自选方法提取纯化样品DNA，本试剂盒与市面上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

为确保实验结果的准确性，稀释操作应在独立区域进行，以避免污染。
1. 标记6个离心管，编号为7，6，5，4，3，2。
2. 向每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL的阳性对照，充分震荡后得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品，放冰待用。
4. 依次在6号、5号管中加入1×10E6和1×10E5的阳性对照，分别震荡并放冰待用。
5. 重复以上操作直至获得6个稀释标准曲线样品。

三、试剂配制

若需检测N个样品，准备N+2个qPCR管（包括1个阴性对照和6个阳性对照），按照说明书将各个成分加入PCR管中，随后转移至样本准备区。

四、添加模板

向qPCR管中分别加入2μL模板，顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、婴儿利什曼虫qPCR阳性对照。之后离心30秒，立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放置于PCR扩增仪器的样品槽中进行扩增，具体扩增程序可参考详细说明书。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线，阳性对照浓度的log值为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线，并根据待测样品的Ct值推算DNA浓度的log值。
2. 无需标准曲线时，按照以下标准判定结果：
- 阳性对照：Ct值<30，典型的S型曲线。
- 阴性对照：Ct值≥38或无Ct值，无明显增长期和平台期。
- 样本结果：Ct值<35，表明阳性；Ct值≥38或无Ct值，表明阴性；Ct值在35-38范围需复检。

运输及保存

产品需低温运输，存储于-20℃，有效期为一年。阳性对照应单独放置，避免污染其他试剂。

选择尊龙凯时的荧光定量PCR检测试剂盒，您将获得业界领先的质量保障与服务支持，为您的科研工作提供强大助力。